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冷凍型高通量組織研磨器處理植物根莖的實驗方案

發(fā)布時間:2025-12-18 來源:新芝生物 瀏覽量:0
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  實驗背景:在植物學(xué)研究與農(nóng)藝檢測中,根莖作為重要的營養(yǎng)與代謝器官,常需提取DNA、RNA、蛋白質(zhì)及次生代謝產(chǎn)物,用于遺傳分析、抗病性評估、成分鑒定或代謝組學(xué)研究。本次采用新芝生物冷凍型高通量組織研磨器處理根莖樣本,該儀器可在低溫條件下高效、均勻地破碎堅韌的植物組織,有效防止生物分子降解,保障后續(xù)實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性與可靠性。

  傳統(tǒng)研磨方法存在的痛點

  組織硬度高、難以破碎:植物根莖通常纖維豐富、結(jié)構(gòu)緊密,傳統(tǒng)研磨方式難以充分破碎細(xì)胞壁,導(dǎo)致提取效率低下。

  生物分子易失活:根莖組織中富含酶類及酚類物質(zhì),研磨過程中易因升溫或氧化導(dǎo)致RNA、蛋白質(zhì)及活性成分降解。

  樣品易氧化褐變:根莖樣本在空氣中暴露研磨易發(fā)生氧化反應(yīng),導(dǎo)致樣品變色、化學(xué)成分改變,影響后續(xù)分析。

  通量低、重復(fù)性差:手工研磨或普通設(shè)備處理根莖樣本耗時費力,且不易實現(xiàn)樣品間的一致性,難以適應(yīng)高通量檢測需求。

  實驗樣品:植物根莖

  實驗?zāi)康?/strong>:驗證新芝生物冷凍型高通量組織研磨器在深低溫條件下,通過高頻振蕩研磨能否有效破碎根莖細(xì)胞壁,保持生物分子完整性,獲得均勻漿狀樣品,滿足后續(xù)分子生物學(xué)與化學(xué)成分分析的要求。

  實驗設(shè)備

SCINETZ-48L冷凍高通量研磨儀

高通量組織研磨器SCIENTZ-48L

  實驗耗材:15ml研磨罐、6mm研磨珠3顆,3mm研磨珠若干

  實驗步驟

  1. 樣本前處理:取新鮮或冷凍保存的根莖組織,切成小段后迅速置于研磨罐中。根據(jù)根莖的纖維程度,加入適量研磨珠。再加入適量預(yù)冷的緩沖液,注意總體積不超過研磨管容量的三分之一。

  2. 參數(shù)設(shè)置:設(shè)定研磨頻率為70Hz,單次運行時間240秒,間歇暫停5秒,循環(huán)5次,采用研磨罐研磨。啟動制冷系統(tǒng),確保研磨全程在4℃低溫環(huán)境下進(jìn)行。

  3. 進(jìn)行研磨:將裝載樣品的適配器置于研磨罐中,配平后鎖緊艙門,啟動程序。設(shè)備執(zhí)行自動間歇研磨,有效控制溫度升高。

  4. 結(jié)束取樣:結(jié)束與取樣:程序結(jié)束后,在潔凈工作臺內(nèi)打開研磨管,即可獲得均勻細(xì)膩的根莖組織,無可見大塊纖維殘留。

  實驗結(jié)果

植物根莖

左:研磨前;右:研磨后

  經(jīng)冷凍型高通量組織研磨器處理后,根莖樣本被徹底破碎為均勻漿狀,纖維與細(xì)胞結(jié)構(gòu)完全破壞。提取的核酸完整性好,蛋白質(zhì)活性得以保持,代謝物提取效率顯著提高,完全適用于PCR、Western Blot、代謝組學(xué)及成分定性與定量分析。

  注意事項

  1.根莖樣本纖維多、硬度大,建議預(yù)先切割為細(xì)小片段,并選擇合適的研磨珠組合以提高破碎效率。

  2.根莖中多酚氧化酶活性較高,操作全程需保持低溫、快速,必要時可添加抗氧化劑。

  3.裝填樣品時不宜過滿,需為研磨珠提供充足運動空間,以達(dá)到最佳破碎效果。

  4.取樣過程建議在潔凈臺內(nèi)進(jìn)行,避免微生物或外部雜質(zhì)污染。

  實驗證明,新芝生物冷凍型高通量組織研磨器能夠有效應(yīng)對根莖類植物樣本的前處理挑戰(zhàn),在低溫環(huán)境下實現(xiàn)高效、均勻的細(xì)胞破碎,顯著提升提取物的質(zhì)量與實驗的一致性。該設(shè)備適用于作物科學(xué)、植物生理、中藥材成分分析及環(huán)境植物學(xué)等多個研究領(lǐng)域,具有重要的應(yīng)用價值與推廣意義。

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